附录D
送风中微生物检验方法
本附录规定了集中空调通风系统送风中细菌总数、真菌总数和-溶血性链球菌的检验方法。
D1 送风中细菌总数
D1.1原理
用仪器法采集集中空调通风系统送风中的细菌,计数在营养琼脂培养基上经35~37℃、48小时培养所形成的菌落数,以每立方米空气中菌落形成单位(cfu/m3)报告。
D1.2 方法与要求
D1.2.1采样点:一般设在距送风口下风方向15~20cm处。
D1.2.2 采样环境条件:采样时集中空调通风系统必须在正常运转条件下,并关闭门窗1小时以上,尽量减少人员活动幅度与频率,记录室内人员数量、温湿度与天气状况等。
D1.2.3 采样方法
以无菌操作,使用六级筛孔空气撞击式采样器,以空气流量为28.3L/min,在采样点采集5-15min。
D1.3 培养
D1.3.1 营养琼脂培养基
成分: 蛋白胨 10g
氯化钠 5g
肉膏 5g
琼脂 20g
蒸馏水 1000ml
制法:将蛋白胨、氯化钠、肉膏溶于蒸馏水中,校正pH值为7.2~7.6,加入琼脂,121℃ 20min灭菌备用。
D1.3.2 方法:将采集细菌后的营养琼脂平皿置35~37℃培养48小时,计数菌落数,记录结果并换算成cfu/m3。
D2 送风中真菌总数
D2.1 原理
用仪器法采集集中空调通风系统送风中的真菌,计数在沙氏琼脂培养基上经28℃、5~7天培养所形成的菌落数,以每立方米空气中菌落形成单位(cfu/m3)报告。
D2.2方法与要求
D2.2.1采样点与D1.2.1款要求相同。
D2.2.2 采样环境条件:采样时集中空调通风系统必须在正常运转条件下,并关闭门窗1小时以上,尽量减少人员活动幅度与频率,记录室内装修状况、人员数量、温湿度与天气状况等。
D2.2.3 采样方法同D1.2.3
D2.3 培养
D2.3.1 沙氏(Sabourand's agar)琼脂培养基
成分: 蛋白胨 10g
葡萄糖 40g
琼脂 20g
蒸馏水 1,000ml
制法:将蛋白胨、葡萄糖溶于蒸馏水中,校正pH值为5.5~6.0,加入琼脂,115℃ 15min灭菌备用。
D2.3.2方法:将采集真菌后的沙氏琼脂培养基平皿置28℃培养5~7天,逐日观察并于第7天记录结果。若真菌数量过多可于第5天计数结果,并记录培养时间,换算成cfu/m3。
D3 送风中-溶血性链球菌
D3.1 原理
用仪器法采集集中空调通风系统送风中的-溶血性链球菌,经35~37℃,24~48小时培养,在血平皿平板上形成典型菌落的为-溶血性链球菌。以每立方米空气中菌落形成单位(cfu/m3)报告。
D3.2 方法与要求
D3.2.1采样点与D1.2.1款要求相同。
D3.2.2 采样环境条件:采样时集中空调通风系统必须在正常运转条件下,并关闭门窗1小时以上,尽量减少人员活动幅度与频率,记录室内人员数量。
D3.3 培养
D3.3.1 血琼脂平板
成分: 蛋白胨 10g
氯化钠 5g
肉膏 5g
琼脂 20g
脱纤维羊血 5~10 ml
蒸馏水 1,000ml
制法:将蛋白胨、氯化钠、肉膏加热溶化于蒸馏水中,校正pH值为7.4~7.6,加入琼脂,121℃ 20min灭菌。待冷却至50℃左右,以无菌操作加入脱纤维羊血,摇匀倾皿。
D3.3.2 方法:采样后的血琼脂平板在35~37℃下培养24~48h。
D3.4 结果观察
培养后,在血平皿平板上形成呈灰白色,表面突起直径0.5~0.7mm的细小菌落,菌落透明或半透明,表面光滑有乳光;镜检为革蓝氏阳性无芽孢球菌,圆形或卵圆形,呈链状排列(视培养与操作条件影响链可短可长4~8个细胞至几十个细胞);菌落周围有明显的2~4mm界限分明、完全透明的无色溶血环。符合上述特征的菌落为-溶血性链球菌。
附录E
空气净化消毒装置阻力检验方法
本附录规定了集中空调通风系统使用的空气净化消毒装置阻力的实验室检验方法。
E1 原理
空气净化消毒装置在实验室空气动力学实验台的条件(按照集中空调通风系统正常运行条件将空气动力学实验台调整到相应的风速)下,分别测定装置入口处空气的全压(Pti)或静压(Psi)和出口处空气的全压(Pt0)或静压(Ps0),按下式得出装置的阻力(△P)。
当空气净化消毒装置前后风道直径相同时:
式中: 装置前检测断面空气平均静压,Pa;
装置后检测断面空气平均静压,Pa;
△h -装置前测定截面到装置入口及装置出口到测定后截面的管道阻力之和,Pa。
E2 设备及仪器
E2.1空气动力学实验台。
E2.2标准皮托管:系数0.99±0.01。
E2.3倾斜式微压计:最小读数应不大于1Pa。
E3 方法
E3.1 静压的测定:将皮托管的静压出口与微压计负压端连接,微压计正压端与大气连通;将皮托管插入风管内,皮托管的全压测孔朝向气流方向,读出静压值。
E3.2 静压的计算:将静压测定值代入上式可得出装置的阻力。附录F
空气净化消毒装置颗粒物净化效率检验方法
本附录规定了集中空调通风系统使用的空气净化消毒装置颗粒物一次通过净化效率和连续运转条件下颗粒物净化效率的实验室检验方法。
F1 颗粒物一次通过净化效率
F1.1 原理
空气净化消毒装置在实验室空气动力学实验台条件下,在空气净化消毒装置前段发生一定浓度的颗粒物,分别测定装置入口处管道空气中PM10颗粒物浓度(C1)和出口处管道空气中PM10颗粒物浓度(C2),按下式得出装置的颗粒物一次净化效率(P1)。
P1=[(C1-C2)/C1]100%
F1.2 设备及仪器
F1.2.1空气动力实验台: 风速范围 1~8m/s;
风速稳定性 10%设定值;
颗粒物浓度范围 0.15~1.5mg/m3;
浓度稳定性 10%。
F1.2.2 重量法检验仪器:
PM10颗粒物采样器 =100.5m, g=1.50.1 2台;
流量控制箱 Q=20~60 L/min 2台;
采气泵 Q=50~100 L/min 2台。
F1.2.3直读式检验仪器:
PM10颗粒物测定仪 =100.5m, g=1.50.1,
精度0.01mg/m3 2台。
F1.3 步骤
F1.3.1 调整实验台的风速,使通过空气净化消毒装置的气流速度满足检验要求。
F1.3.2 确定颗粒物等动力采样条件。
F1.3.3 利用颗粒物发生器在空气净化消毒装置前段发生2~6微米粒径的单分散相标准粒子,其颗粒物浓度在3~10倍标准值范围内。
F1.3.4 根据颗粒物浓度与空气净化消毒装置原理,选择采用重量法或直读式仪器进行检测。
F1.3.5 在检测断面的中心设置一个或多个检测点,重量法仪器或直读式仪器均应在该点取样。
F1.3.6 使用重量法仪器检测时,要根据颗粒物浓度、天平感量和采气流量确定采样时间,采样时间原则上不应少于30分钟。
F1.3.7 使用两台直读式颗粒物浓度测定仪检测时,两台测定仪的型号和性能应相同。
F1.3.8 测定仪应在读数稳定后读取结果。
F1.3.9 采用重量法采样或直读式测尘仪测定,均应采样或测定3次,取3次平均值作为检测断面浓度C1和C2。
F2 连续运行条件下颗粒物净化效率
F2.1 原理
空气净化消毒装置在空气动力学实验台条件下,使空气净化消毒装置在PM10颗粒物浓度0.5~1.5毫克/立方米的稳定环境中连续运行24小时后,分别测定装置入口处管道空气中PM10颗粒物浓度(Ct1)和出口处管道空气中PM10颗粒物浓度(Ct2),按下式得出此时装置的颗粒物净化效率(Pt)。
Pt=[(Ct1-Ct2)/Ct1]100%
由下式得出装置颗粒物净化效率下降的百分数。
[(p1-pt)/p1] 100%
F2.2 设备及仪器
与颗粒物一次通过净化效率检测时使用的设备与仪器相同。
F2.3 步骤
与颗粒物一次通过净化效率检测时的步骤相同。
附录G
空气净化消毒装置微生物净化消毒效果检验方法
本附录规定了集中空调通风系统使用的空气净化消毒装置微生物一次通过净化效率或消毒效果的检验方法。
G1 原理
通过测定一定状态下空气中微生物数量在空气净化消毒装置前后的变化来计算净化或消毒效率,从而评价空气净化消毒装置的净化消毒效果。
G2 实验器材
G2.1试验菌:空气中的自然菌。
G2.2 采样器:六级筛孔空气撞击式采样器。
G2.3 磷酸盐缓冲液:0.03 mol/L,pH 7.2。
G2.4 营养琼脂培养基
G2.5 温度计
G2.6 湿度计
G3 实验方法
G3.1 按空气净化消毒装置的技术要求将其安装在实验设备上。
G3.2 分别将六级筛孔空气撞击式采样器置于空气净化消毒装置前后的中间位置,开启空气净化消毒装置,待运行稳定后,同时采集装置前后的空气,流量为28.3L/min,采样时间为5~15分钟。采样结束后,将平板放入培养箱中培养,同时将同批次试验用培养基置35~37℃培养箱中培养作为阴性对照,48小时记录结果。试验重复 3次。
G3.3 消除率的计算按下式进行:
G4 评价规定
消除率均≥50%为净化合格,≥90% 者为消毒合格。
阴性对照组应无菌生长;净化消毒前的菌量在 500~2500cfu/m3。 附录H
风管内表面积尘量检验方法
本附录规定了集中空调通风系统风管内表面积尘量的检验方法。
H1 原理
采集风管内表面规定面积的全部积尘,以称重方法得出风管内表面单位面积的积尘量,表示风管清洗后的清洁程度或空调风管的污染程度。
H2 器材
H2.1 采样面积为50或100平方厘米。
H2.2 无纺布或其它不易失重的材料。
H2.3 密封袋。
H2.4 采样工具或设备。
H2.5 天平,精度0.0001g。
H2.6 一次性塑料手套。
H3 风管清洗后的清洁程度检验步骤
H3.1 采样时间
采样应在风管清洗后的七日内进行。
H3.2 采样点
在清洗后确定检测的每套集中空调通风系统的主风管中(如送风管、回风管、新风管)至少选择5个代表性采样点。
H3.3 采样
H3.3.1将采样用的材料放在105C恒温箱内干燥2小时然后放入干燥器内冷却4小时,或直接放入干燥器中存放24小时后,放入密封袋用天平称量出初重。
H3.3.2 在风管的采样位置确定采样面积,并将采样面积内风管内壁上的残留灰尘全部取出。
H3.3.3 将采样后的积尘样品放回原密封袋中保管,并进行编号。
H3.4 实验室分析
H3.4.1 将样品按H3.3.1处理、称量,得出终重。
H3.4.2 将各采样点的积尘样品终重与初重之差作为各采样点的残留灰尘重量。
H3.4.3 根据每个采样点残留灰尘重量和采样面积换算成每平方米风管内表面的残留灰尘量。
H3.5 结果表示方法
取各个采样点残留灰尘量的平均值为风管清洁程度的判定指标,以g/m2表示。
H3.6 影像资料的制备
采用机器人对每个监测点所代表的风管区域内表面情况进行录像,并将其制作成录像带或光盘等影像资料。
H4 风管污染程度的检验步骤
H4.1 采样位置
在确定检测的每套集中空调通风系统的主风管上(如新风、送风和回风管)至少选择5个代表性采样点;如果无法在主风管采样时,可抽取全部送风口的5-10%且不少于5个作为采样点。
H4.2 采样方法
H4.2.1 在主风管采样时将维修孔、清洁孔打开或现场开孔。
H4.2.2 在送风口采样时将风口拆下。
H4.2.3 采样应在确定的面积内将风管表面全部积尘收集,并完好带出风管。
H4.3 其它
风管污染程度检验中风管积尘量的检验器材、检验分析方法与风管清洗后的清洁程度检验相同。
附录I
风管内表面微生物检验方法
本附录规定了集中空调通风系统风管内表面细菌总数和真菌总数的检验方法。
I1 采样
I1.1 采样点:数量和分布同附录H 3.2。
I1.2 采样面积:每一点采样面积应为50cm2。
I1.3 采样方法:空调风管内表面积尘较多时用刮拭法采样,积尘较少不适宜刮拭法采样时用擦拭法采样。整个采样过程应无菌操作。为避免人工采样对采样环境的影响,宜采用机器人采样。
I2样品检测
刮拭法:将采集的积尘样品无菌操作称取1g,加入到0.01% Tween-80水溶液中,做10倍梯级稀释,取适宜稀释度1ml倾注法接种平皿。
擦拭法:将擦拭物无菌操作加入到0.01% Tween-80水溶液中,做10倍梯级稀释,取适宜稀释度1ml倾注法接种平皿。
I3 培养与计数
细菌和真菌培养与计数方法见附录D。